核酸蛋白互作（RNA/DNA pull down、CHIRP-MS）服務

核酸蛋白互作（RNA/DNA pull down、CHIRP-MS）服務
（DH1008）

一、服務介紹
       核酸蛋白互作（RNA/DNA pull down、CHIRP-MS）用于目的RNA或DNA的互作蛋白驗證或篩選，這三種技術是捕獲RNA/DNA-蛋白復合體的*常用方法，結合western-blot實驗可以驗證某種蛋白是否與目的RNA/DNA互作，結合質譜技術可以高通量鑒定與RNA/DNA結合的目的蛋白。
       RNA/DNA pull down是研究體外條件下RNA或DNA與蛋白互作的重要技術。該技術通過體外轉錄目的RNA的一部分或全長，用生物素標記轉錄產物，再與鏈霉親和素磁珠孵育使之固定在磁珠上，用以“pull down”互作蛋白，純化的產物蛋白經特定抗體的western-blot實驗，可驗證某種蛋白與目的RNA/DNA是否有相互作用；純化的蛋白經質譜鑒定，即可篩選到與目的RNA結合的蛋白。
       CHIRP-MS是研究體內條件下RNA與蛋白互作的技術。該技術在特定時間點用甲醛交聯等方式固定細胞內RNA與蛋白及核酸的互作復合物，再利用生物素標記的探針及鏈霉親和素磁珠純化出與RNA結合的蛋白及核酸的復合物，分離產物中的蛋白質做質譜鑒定，即可篩選出與目的RNA結合的蛋白。
 
二、服務內容及價格

 
三、客戶提供
1、目的基因、目的蛋白信息。（包括物種、序列或者ID，保密文件除外）
2、細胞株及培養信息
3、待測蛋白信息及檢測所用蛋白抗體
4、相關文獻（可選）。
 
四、服務流程
1）載體構建GST-靶蛋白融合表達載體
2）GST-靶蛋白表達
3）WB檢測蛋白融合情況
4) 細胞裂解，獲取總蛋白裂解液
5)  GST-pull down調取互作結合蛋白
6） 蛋白純化
7） 數據分析及Result Figure處理
 
五、提交給客戶結果
1、原始數據、結果圖片（包括Input、陽性及陰性對照結果）；
2、標準實驗報告（包括詳細的材料與方法）；
3、SCI標準Result Figure。
 
六、服務項目說明
1.實驗周期：具體需要根據實驗情況而定。
2.對實驗有特殊要求，請另詢價。
3.雙方簽訂合同后，收取50%首付后啟動實驗。